研究背景
結(jié)直腸癌(Colorectal Cancer，CRC) 是消化道中常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展和生活水平的提高，人們的飲食習(xí)慣及膳食結(jié)構(gòu)發(fā)生了轉(zhuǎn)變，
因此CRC發(fā)病率也呈現(xiàn)出了明顯的上升趨勢(shì)。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌已經(jīng)升至全球癌癥死亡原因的第二位，僅次于肺癌。這也說(shuō)明，在全球
各地，結(jié)直腸癌在預(yù)防和治療上均面臨著巨大的挑戰(zhàn)。
2020年全球主要癌癥死亡類型、人數(shù)及占比
目前有關(guān)CRC的具體發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，因此對(duì)其病因、發(fā)病機(jī)制以及藥物治療方面的研究變得日益迫切。研究過(guò)程中，為了探索復(fù)雜的發(fā)病
和發(fā)展的機(jī)制，以人類診斷和治療為導(dǎo)向的實(shí)驗(yàn)通常會(huì)用到動(dòng)物模型做臨床前研究。
一、結(jié)直腸癌中的動(dòng)物模型
大多數(shù)結(jié)直腸癌都是散發(fā)性或家族性的，炎癥性腸病(Inflammatory bowel disease, IBD)相關(guān)的結(jié)直腸癌僅占1-2％，但炎癥性腸病遷延30年后超
過(guò)18%的患者會(huì)發(fā)展為結(jié)直腸癌，且致死率也顯著高于散發(fā)性結(jié)直腸癌。因此早期對(duì)炎癥及其在結(jié)直腸癌發(fā)生中的作用的研究主要集中在炎癥性結(jié)
腸癌（CAC），一種很可能出現(xiàn)在炎癥性腸病患者中的特殊形式的CRC。臨床癥狀學(xué)、形態(tài)學(xué)及病理學(xué)觀察證明AOM/DSS模型與人類潰瘍性結(jié)腸炎
癌變過(guò)程極為相似，能夠很好地模擬慢性腸道炎癥誘發(fā)腫瘤的生理病理過(guò)程，因此被廣泛用于CAC形成機(jī)制的研究中。
氧化偶氮甲烷（Azoxymethane，AOM）/葡聚糖硫酸鈉（Dextarn Sodium Suipate，DSS）模型是一種結(jié)合DSS誘發(fā)的潰瘍性結(jié)腸炎和致癌物AOM
誘導(dǎo)的大鼠CAC模型，氧化偶氮甲烷是一種甲基化劑，它可以在DNA中形成6-O-甲基鳥(niǎo)嘌呤。除非甲基化的堿基被細(xì)胞酶修復(fù)，否則會(huì)導(dǎo)致堿基錯(cuò)配，
從而誘導(dǎo)組織中的腫瘤形成。葡聚糖硫酸鈉則是一種促炎藥物，溶解于大小鼠的飲水中，可引起嚴(yán)重的以腹瀉為主要特征的潰瘍性結(jié)腸腸炎，長(zhǎng)期反
復(fù)接觸可發(fā)生慢性腸炎。
二、AOM/DSS造模優(yōu)勢(shì)
1. 方法簡(jiǎn)單；
2. 重復(fù)性好；
3. 7-10周即可建立腫瘤模型；
4. 可用于任何遺傳背景的動(dòng)物（敲除、轉(zhuǎn)基因等)。
三、AOM/DSS 實(shí)驗(yàn)造模流程
AOM/DSS 模型誘導(dǎo)方法主要有兩種：
“四步法”為AOM單劑量(7.5-12.5 mg/kg) 腹腔注射后，即時(shí)或1周后飼喂含1%-3%DSS飲水4-7 天 ，之后改為正常飲水14天為1個(gè)循環(huán)，共循環(huán)3 次；
“兩步法”與前者的區(qū)別在于將3次循環(huán)的DSS處理縮短為單次循環(huán)，共兩步完成。
AOM/DSS結(jié)直腸癌造模步驟
四、AOM/DSS造模案例分享
參考文獻(xiàn)
造模流程
1. 選取8-12周、體重約為22 g的小鼠，做好尾巴標(biāo)記或耳夾；
2. 第0天，記錄初始體重，每只小鼠腹腔注射10mg/kg AOM工作液（濃度為1 mg/mL溶解于無(wú)菌生理鹽水中，儲(chǔ)存于-20°C）；
3. 用常規(guī)飲用水喂食一周；
4. 用2.5%的葡聚糖硫酸鈉DSS溶液替換飲用水喂食一周；
5. 再換成常規(guī)飲用水喂食兩周；
6. 步驟4和步驟5共重復(fù)3次。
AOM/DSS造模流程
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1. 經(jīng)AOM/DSS造模后，小鼠體重減輕5-10%，在本實(shí)驗(yàn)中，體重減輕是結(jié)腸炎嚴(yán)重程度的初步判斷標(biāo)志。
2. AOM/DSS造模50天后，與正常結(jié)腸(a)相比，模型組產(chǎn)生了多發(fā)性息肉樣腫塊阻塞末端結(jié)腸管腔（b、c）。
3. 處死后取小鼠結(jié)腸，可觀察形成的腫瘤。值得注意的是，末端結(jié)腸/直腸腫瘤負(fù)荷較高（左上圖），近端結(jié)腸腫瘤呈現(xiàn)褶皺狀紋理（右上圖），腫
瘤負(fù)荷很少。近距離觀察末端結(jié)腸可觀察到許多不同大小的腫瘤（下圖）。
4. 使用阿新藍(lán)染劑染色結(jié)腸，有助于觀察到結(jié)腸內(nèi)的紋理及腫瘤邊界，能夠精確測(cè)量腫瘤大小。
5. 選取末端結(jié)腸中代表性的腫瘤組織，采用H&E、BrdU和β-catenin免疫組化染色分別在50×和400×進(jìn)行組織學(xué)觀察，可明顯觀察到類似于人類
結(jié)腸腺癌的病變表現(xiàn)。
結(jié)論
本研究顯示了一種通過(guò)DSS和AOM結(jié)合的結(jié)腸炎相關(guān)癌癥誘導(dǎo)的有效、詳細(xì)的方案。AOM/DSS模型方法簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)短，僅需7-10周，可用于
任何遺傳背景的小鼠（敲除、轉(zhuǎn)基因等），且不與特定的致瘤菌株雜交。
五、MP腸道疾病模型相關(guān)產(chǎn)品信息
除以上研究方向外，仍有關(guān)于結(jié)腸癌靶向治療、轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌的管理等多方面研究正在進(jìn)行中。目前，炎癥性結(jié)腸炎/結(jié)腸癌研究中廣泛采用的
AOM/DSS誘導(dǎo)結(jié)腸癌模型，通過(guò)臨床癥狀學(xué)、形態(tài)學(xué)及病理學(xué)觀察證明與人類潰瘍性結(jié)腸炎癌變過(guò)程極為相似。
MP Biomedicals擁有數(shù)十年腸道研究經(jīng)驗(yàn)，能夠提供高純度高質(zhì)量的DSS和AOM用于誘導(dǎo)潰瘍性結(jié)腸炎及結(jié)腸癌等疾病，其中DSS是目前腸炎造
模研究領(lǐng)域金標(biāo)準(zhǔn)。迄今為止，有超過(guò)10,000篇科學(xué)文獻(xiàn)引用，有效性得到了業(yè)界廣泛認(rèn)可。同時(shí)針對(duì)客戶對(duì)腸道菌群的研究需求，MP也提供多
種針對(duì)動(dòng)物組織、糞便及腸道內(nèi)容物的核酸提取試劑盒，提取的核酸濃度高、純度好可直接應(yīng)用于下游實(shí)驗(yàn)分析。
下列產(chǎn)品均有國(guó)內(nèi)現(xiàn)貨庫(kù)存，可穩(wěn)定供應(yīng)。
| 貨號(hào) | 英文名 | 中文名 | 包裝 | CAS 號(hào) | 2026目錄價(jià) |
| 0216011010 | Dextran Sulfate Sodium Salt, Colitis Grade | 葡聚糖硫酸鈉(DSS)，腸炎造模級(jí)，分子量36,000-50,000 | 10 g | 9011-18-1 | 2594.11 |
| 0216011050 | Dextran Sulfate Sodium Salt, Colitis Grade | 葡聚糖硫酸鈉(DSS)，腸炎造模級(jí)，分子量36,000-50,000 | 50 g | 9011-18-1 | 6485.27 |
| 0216011080 | Dextran Sulfate Sodium Salt, Colitis Grade | 葡聚糖硫酸鈉(DSS)，腸炎造模級(jí)，分子量36,000-50,000 | 100 g | 9011-18-1 | 9922.46 |
| 0216011090 | Dextran Sulfate Sodium Salt, Colitis Grade | 葡聚糖硫酸鈉(DSS)，腸炎造模級(jí)，分子量36,000-50,000 | 500 g | 9011-18-1 | 41414.91 |
| 0218397125 | Azoxymethane | 氧化偶氮甲烷（AOM） | 25 mg | 25843-45-2 | 4412.54 |
| 0218397180 | Azoxymethane | 氧化偶氮甲烷（AOM） | 100 mg | 25843-45-2 | 12060.86 |
| 116547050 | SPINeasy? DNA Pro Kit for Feces | SPINeasy?糞便基因組DNA提取試劑盒，升級(jí)款 | 50 PREPS | 無(wú) | 2940.00 |
| 116555050 | SPINeasy? DNA/RNA Kit for Feces | SPINeasy?糞便基因組DNA/RNA提取試劑盒 | 50 PREPS | 無(wú) | 3350.00 |
| 116556050 | SPINeasy? RNA Kit for Feces | SPINeasy?糞便總RNA提取試劑盒 | 50 PREPS | 無(wú) | 3200.00 |
| 116570400 | MagBeads FastDNA Kit for Feces | MagBeads 糞便基因組DNA提取試劑盒（磁珠法） | 50 PREPS | 無(wú) | 2887.50 |
| 116558050 | SPINeasy? DNA Kit for Tissue (With Lysing Matrix) | SPINeasy? 組織基因組DNA提取試劑盒,含裂解介質(zhì) | 50 PREPS | 無(wú) | 2000.00 |
| 116543050 | SPINeasy? RNA Kit for Tissue (With Lysing Matrix) | SPINeasy? 組織總RNA提取試劑盒，含裂解介質(zhì) | 50 PREPS | 無(wú) | 2642.53 |
| 116575192 | MagBeads FastDNA Kit | MagBeads 基因組DNA提取試劑盒（磁珠法） | 192 PREPS | 無(wú) | 4331.25 |
| 116572096 | MagBeads FastRNA Kit | MagBeads RNA提取試劑盒（磁珠法） | 96 PREPS | 無(wú) | 4725.00 |
六、產(chǎn)品已發(fā)表文章(部分精選高分文獻(xiàn))
[1] Sun X, He L, Liu H,et al. The diapause-like colorectal cancer cells induced by SMC4 attenuation are characterized by low proliferation
and chemotherapy insensitivity. Cell Metab. 2023 Sep 5;35(9):1563-1579.e8.IF=29.0
[2] Wang L, Tang L, Feng Y,et al. A purified membrane protein from Akkermansia muciniphila or the pasteurised bacterium blunts colitis
associated tumourigenesis by modulation of CD8+ T cells in mice. Gut. 2020 Nov;69(11):1988-1997 .IF=24.5
[3] Schewe M, Franken PF, Sacchetti A,et al. Secreted Phospholipases A2 Are Intestinal Stem Cell Niche Factors with Distinct Roles in Homeostasis,
Inflammation, and Cancer. Cell Stem Cell. 2016 Jul 7;19(1):38-51. IF=23.9
[4] Lee KW, Yeo SY, Gong JR,et al. PRRX1 is a master transcription factor of stromal fibroblasts for myofibroblastic lineage progression.
Nat Commun. 2022 May 19;13(1):2793. IF=16.6
[5] Cui HY, Wei W, Qian MR, et al. PDGFA-associated protein 1 is a novel target of c-Myc and contributes to colorectal cancer initiation and
progression. Cancer Commun (Lond). 2022 Aug;42(8):750-767. IF=16.2
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