P2RY12（也稱為P2Y12）是一種腺苷5'-二磷酸（ADP）受體，也是嘌呤能G蛋白偶聯(lián)受體P2Y家族的成員。它在外周

組織的血小板中表達(dá)，也在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)小膠質(zhì)細(xì)胞（Homeostatic Microglia)中特異性表達(dá)。由于P2RY12幾乎

不在巨噬細(xì)胞中表達(dá)，所以它是用于區(qū)分存在腦血管周圍的巨噬細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的有效標(biāo)志物^1）。此外，ADP可用

作細(xì)胞損傷的信號，小膠質(zhì)細(xì)胞中的P2RY12被認(rèn)為在接收神經(jīng)細(xì)胞損傷方面發(fā)揮作用。

本產(chǎn)品為豚鼠來源多克隆抗體，可用于免疫組織染色的多重染色。

外觀：液體

濃度：蛋白濃度0.45～0.65 mg/mL

1) Butovsky, O. et al.: Neurosci., 17(1), 131(2014).

抗體信息

※ 大鼠的染色實例請查看下方“數(shù)據(jù)”部分。

Protocol（示例）

1 灌注固定

使用檸檬酸鈉/PBS灌注除血后，4% PFA灌注

2 后固定

4% PFA（～24 h）

3 蔗糖替換

30%蔗糖/PBS（4℃，過夜~約2天）

4 制備冰凍切片

去除蔗糖后，制備冰凍包埋塊，并用低溫恒溫器制備30 μm厚的切片

5 封閉

5%正常山羊血清，0.3% Triton X-100/PBS（4℃，過夜）

6一抗

抗P2RY12，豚鼠（1︰1,000），1%正常山羊血清，0.3% TritonX-100/PBS（4℃，過夜~2 天）

7 清洗

0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)

8 二抗

Alexa Fluor? 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG（H+L）（1:500）（產(chǎn)品編號：568-77901)，1%正常山羊血清，0.3% TritonX-100/PBS（室溫，2 h）

9 清洗

0.3% TritonX-100/PBS（5 min×3次）

10 封裝

封片劑封裝，4℃下避光存儲

性能數(shù)據(jù)

與抗Iba1抗體比較

使用抗P2RY12抗體和抗Iba1抗體對小鼠大腦（冰凍切片）進(jìn)行免疫組織染色。

<數(shù)據(jù)提供>

京都工藝?yán)w維大學(xué) 應(yīng)用生物學(xué)系 宮田老師

使用抗體

P2RY12

一抗：抗P2RY12，豚鼠（產(chǎn)品編號：011-28873，本產(chǎn)品）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor? 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG（H+L）（產(chǎn)品編號：568-77901）

Iba1

一抗：抗iba1，兔源（免疫細(xì)胞化學(xué)用）（產(chǎn)品編號：019-19741）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor? 594-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG（H+L）（產(chǎn)品編號：566-80511）

【結(jié)果】

已確認(rèn)P2RY12信號和Iba1信號的共定位。

鑒別小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞

使用抗P2RY12抗體（小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物）、抗Iba1抗體（小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞標(biāo)志物）和抗層粘連蛋白抗體（腦血管基底膜標(biāo)志物）對小鼠大腦皮層和延

髓末端的冰凍切片進(jìn)行三重染色，確認(rèn)細(xì)胞定位。

<數(shù)據(jù)提供>

京都工藝?yán)w維大學(xué) 應(yīng)用生物學(xué)系 宮田老師

使用抗體

P2RY12

一抗：抗P2RY12，豚鼠（產(chǎn)品編號：011-28873，本產(chǎn)品）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor? 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG（H+L）（產(chǎn)品編號：568-77901）

Iba1

一抗：抗iba1，兔源（免疫細(xì)胞化學(xué)用）（產(chǎn)品編號：019-19741）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor? 594-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG（H+L）（產(chǎn)品編號：566-80511）

層粘連蛋白

一抗：抗層粘連蛋白抗體（大鼠，宮田老師實驗室制備）1︰200

二抗：DyLight? 405 結(jié)合AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L)（生產(chǎn)商編碼：112-475-003）

【結(jié)果】

Iba1陽性細(xì)胞中，腦實質(zhì)內(nèi)的細(xì)胞呈P2RY12陽性，可能是小膠質(zhì)細(xì)胞（三角箭頭）。而Iba1陽性/P2RY12陰性的細(xì)胞存在于腦血管基底膜周圍，這些細(xì)胞可

能是巨噬細(xì)胞（箭頭）。

與抗Iba1抗體和抗TMEM119抗體比較

使用抗P2RY12抗體、抗Iba1抗體和抗TMEM119抗體對小鼠大腦和脊髓（冰凍切片）進(jìn)行免疫組織染色。

使用抗體

P2RY12

一抗：抗P2RY12，豚鼠（產(chǎn)品編號：011-28873，本產(chǎn)品）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor? 647 AffiniPure Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L)（產(chǎn)品編號：566-78421）

Iba1

一抗：抗iba1，山羊源（產(chǎn)品編號：011-27991）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor 488 AffiniPure Donkey Anti-Goat IgG (H+L) (產(chǎn)品編號：561-78351)

TMEM119

一抗：其他公司抗TMEM119抗體（兔源）1︰100

二抗：Alexa Fluor? 594-AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG（H+L）（產(chǎn)品編號：561-78471）

【結(jié)果】

與抗TMEM119抗體相比，使用FUJIFILM Wako的抗P2RY12抗體染色能更清晰地檢測細(xì)微的突起結(jié)構(gòu)。

與其他公司產(chǎn)品比較

使用本產(chǎn)品和其他公司的抗P2RY12抗體對小鼠大腦和脊髓（冰凍切片）進(jìn)行免疫組織染色。

使用抗體

本產(chǎn)品

一抗：抗 P2RY12，豚鼠（產(chǎn)品編號：011-28873，本產(chǎn)品）1︰1,000（抗體濃度：0.5 μg/mL）

二抗：Alexa Fluor? 488 AffiniPure Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L)（產(chǎn)品編號：562-78401）

其他公司產(chǎn)品

一抗：其他公司 抗P2RY12（兔源）1︰200（抗體濃度：0.5 μg/mL）

二抗：Alexa Fluor? 488 AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG（H+L）（產(chǎn)品編號：567-78451）

【結(jié)果】

傳統(tǒng)產(chǎn)品中可觀察到神經(jīng)細(xì)胞的非特異性信號（三角箭頭），而本產(chǎn)品中幾乎檢測不到非特異性信號。

應(yīng)用數(shù)據(jù)

免疫組織染色

用戶反饋

以下是研究人員提供的評估問卷結(jié)果。

評價（原文翻譯）

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